Antijenlerin ve antikorların belirlenmesinde farklılığa bağlı olarak, doğrudan yöntem, dolaylı yöntem, çift antikor sandviç yöntemi (doğrudan, dolaylı) gibi birçok otomatik ELISA ölçüm modu vardır. Rekabetçi inhibisyon yöntemi (doğrudan, sandviç, vb.), yakalama yöntemi, vb. Klinik laboratuvarlarda, Yaygın olarak kullanılan ELISA ölçüm modları çift antikor sandviç yöntemi, dolaylı yöntem, çift antijen sandviç yöntemi, rekabetçi inhibisyon yöntemi ve yakalama yöntemini içerir.
Antijenlerin belirlenmesinde, protein makromolekül antijenlerinin belirlenmesi için en yaygın kullanılan mod, çift antikor sandviç yöntemidir. Sadece tek bir epitope olan küçük moleküller için, rekabetçi inhibisyon yöntemi kullanılır; Antikor tayini genellikle dolaylı yöntem, çift antijen sandviç yöntemi, rekabetçi inhibisyon yöntemi ve yakalama yöntemi kullanır.
1. ELISA iş istasyonunun çift antikor sandviç yöntemi
Birden fazla epitop içeren makromoleküler proteinler içinELISA iş istasyonuOldukça basit olduğunu belirlemek için çift antikor sandviç yöntemini kullanır. Protein antijenlerini ölçmek için mevcut ticari kitler temel olarak tüm bu ölçüm modunu benimsemektedir.
Antijenlerin çift antikorlu sandviç tespiti için ilk tam otomatik ELISA kitleri "iki aşamalı yöntem" ni kabul etti. Daha sonra, algılama süresini kısaltmak ve operasyon adımlarını basitleştirmek için, reaktif üreticileri yavaş yavaş "tek adım" tanıttıTıbbi test kiti.
Şu anda, klinik laboratuvarımızda, HBsAg, alfa-fetoprotein (a-fetoprotein, αFP), prostat spesifik antijen (PSA), CA serisi belirteçleri gibi makromoleküler antijenlerin belirlenmesi, hCG ve hormonlar, vb temelde bir adım yöntemi kullanın. İki adımlı yöntemle karşılaştırıldığında, tek adımlı yöntem kullanımı basittir, ancak doğal eksiklikleri vardır. İyi işlenmezse, çift antikorlu sandviç immünoassay sonuçları, kanca etkisinin varlığı nedeniyle yanlış negatif veya düşük nicel sonuçlar olacaktır.
2. ELISA iş istasyonunun rekabetçi hukuk testi
Digoxin, theophylline ve T3, T4 ve testosteron gibi diğer ilaçlar ve hormonlar gibi küçük molekül haptens sadece bir epitope olabilir. Ya da molekül çok küçük olduğundan, bir antikora bağlandıktan sonra, sterik engel nedeniyle başka bir antikora bağlanamaz, bu nedenle çift antikorlu sandviç yöntemi ölçüm için kullanılamaz. ELISA iş istasyonu sadece rekabetçi inhibisyon yöntemini kullanabilir.
Bu test modunda, küçük moleküllerin ve enzimlerin bir kombinasyonu elde edilmelidir. Küçük molekül enzim konjugatlarının hazırlanması, antikor enzim konjugatları kadar basit değildir ve saflaştırılması da oldukça zordur. Küçük molekül bağlı enzim ile serbest enzim arasındaki molekül ağırlık farkı küçüktür ve genel moleküler elek yöntemleri kullanılarak ayrılması zordur. Bu nedenle, bazı insanlar di-veya multimer küçük moleküllerin sentezine dayalı küçük moleküllerin belirlenmesi için çift antikorlu sandviç yarışması ELISA yöntemi oluşturmaya çalışırlar. Kararlılığın hassasiyeti ve özgüllüğü geliştirildi.
3. ELISA iş istasyonunda antikor tayini dolaylı yöntemi
Enfeksiyöz hastalıkların patojen antijenlerine karşı vücut tarafından üretilen antikorları ölçün ve aynı şey için doğrudur.Antikor test kiti. Yüksek saflıkta ve iyi tanımlanmış antijenleri elde etmek zor olmadan veya antijenler daha karmaşık olduğunda, dolaylı yöntem genellikle kullanılır.
Günümüzde hepatit C virüs antikorunun (anti-hcv) yaygın olarak kullanılan klinik test öğeleri tüm dolaylı yöntemlerdir ve dolaylı yöntem antikorları tespit etmek için kullanılır. Kesinlikle, sadece IgG antikorları sınıfı ölçülür ve IgM ve IgA sınıfları dahil değildir. Bu, enzim etiketli ikincil antikor tarafından belirlenir. Şu anda, bazı özel ig. antikor algılama kitleri dolaylı yöntemi benimsemektedir.
4. ELISA iş istasyonunun çift antijen sandviç yöntemi
Çift antijen sandviç yöntemi ile ölçülen antikorlar, her türlü spesifik antikorları içerir ve spesifik olmayan IgG tarafından müdahale edilmez. Bu nedenle, antikorları tespit etmek için çift antijen sandviç yönteminin duyarlılığı ve özgüllüğü dolaylı yöntemden daha yüksektir. Şu anda, antikor tayininin hassasiyetini arttırmak için, ELISA iş istasyonunun kiti temelde çift antijen sandviç yöntemini benimsemiştir. Antijeni nedeniyle anti-hcv 'nin daha karmaşık olması dışında.
5. ELISA iş istasyonu rekabet yasası
Antikorların belirlenmesi genellikle bir rekabet yöntemi kullanmaz. Antijendeki safsızlıkların giderilmesi zor olduğunda veya antijenin bağlanma özelliği kararsız olduğunda, ELISA iş istasyonu antikorları belirlemek için bu modu kullanabilir. En tipik örnek hepatit B virüs çekirdeği antikorunun (HBcAb) ve hepatit B virüs e antikorunun (HBeAb) belirlenmesidir.
Bize e-posta: