ELISA iş istasyonunun testi, yüksek duyarlılığı ve iyi özgüllüğü nedeniyle klinik olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak, operasyondaki her bağlantı testin algılama etkisi üzerinde daha büyük bir etkiye sahiptir. Dikkat etmezseniz, eksik renk oluşturma, desen oluşturma ve diğer sonuçlara yol açabilir. Operasyonun her bir bağlantısında sık sık ortaya çıkan sorunların nedenlerini ve çözümlerini özetliyoruz, size biraz ilham vermeyi ve deneyin kalitesini geliştirmeyi umuyoruz.
Ⅰ. Ⅰ Tam otomatik ELISA için reaktiflerin seçimi
Için yüksek kaliteli algılama reaktifleri seçinTam otomatik ELISAVe talimatlara sıkı sıkıya bağlı olarak çalışır. Operasyondan önce, reaktifleri oda sıcaklığında 30-60 dakika dengeleyin.
Ⅱ. Tam otomatik ELISA örnek yükleme
1. Olası sebepler:
(1) serum veya plazma örneklerinin ayrılması iyi değilse, örnekler ekleyin;
(2) manuel operasyonda, çok fazla örnek plaka, numuneyi inkübatöre koymadan önce çok uzun bekleme süresine neden olur (özellikle iç ortam sıcaklığı yüksek olduğunda);
(3) numuneyi ekledikten ve enzim reaktifini ekledikten sonra, enzim delikten sıçradı.
2. Çözüm:
(1) örnek serumdur: kanı doğal olarak 1-2 saat saklamak en iyisidir ve daha sonra 15 dakika boyunca 3000 rpm'de santrifüj yapın;
Numune plazmadır: antikoagülan içeren bir kan örneği toplama tüpü kullanılmalıdır ve kan toplama tüpü kan toplanmasından hemen sonra 5-10 kez ters çevrilmeli ve karıştırılmalıdır. Bir süre sonra, 15 dakika boyunca 3000 rpm'de santrifüj yapın;
Birkaç gün içinde test edilirse, 2-8 ° c'de bir buzdolabına yerleştirilebilir ve depolanması gerekiyorsa,-20 ° c'de düşük sıcaklıkta bir buzdolabına yerleştirilebilir.
(2) numuneyi ekledikten sonra numuneyi zamanında inkübatöre koyun.
(3) enzim reaktifini ekledikten sonra, mikrotiter plakasının yüzeyini kurutmak için emici kağıt ile silin.
(4) AT veya diğer otomatik örnek ekleme kullanılırsa, enzim reaktifleri eklemek için şöhret veya diğer işlem sonrası enstrümanları seçmek en iyisidir.
(5) birçok örnek olduğunda, lütfen gruplar halinde çalıştırın.
Ⅲ. Tam otomatik elisa'nın inkübasyon
1. Olası sebepler:
(1) inkübasyon sırasında kapak veya kapak yoktur, böylece numune veya seyreltici buharlaşır ve deliğin duvarına adsorbe edilir ve iyice temizlemeyi zorlaştırır;
(2) inkübasyon süresi yapay olarak uzar, bu da reaksiyonun etrafına sıkıca bağlanmayan bir bağlanma ile sonuçlanır ve iyice temizlemeyi zorlaştırır.
2. Çözüm:
(1) bir kapak sayfası veya kapak takın;
(2) talimatlara göre çalışma süresini kesinlikle kontrol edin.
Ⅳ. Tam otomatik ELISA yıkama plakası
1. Olası sebepler:
(1) plakayı manuel olarak yıkayın ve delikler arasındaki sıvı haçlar;
(2) yarı otomatik plaka yıkayıcı plakaları yıkamak için kullanıldığında, eksik plaka yıkamaya yol açan yıkama sıvısı miktarı yetersizdir; plaka yıkama iğnesinin tıkanması eksik emmeye neden olur; Zayıf plaka yıkama zayıf plaka yıkama etkisi ile sonuçlanır;
(3) çok fazla reaksiyon plakası, yıkama plakaları için uzun bekleme süresine neden olur.
2. Çözüm:
(1) losyonun delikleri doldurduğundan ve yıkama iğnesinin engellenmediğinden emin olun. Plakayı yıkadıktan sonra, emici kağıda hafifçe kurutmak en iyisidir (temiz, az veya tozlu emici malzeme seçin);
(2) makul bir şekilde düzenleyin veya daha fazla plaka yıkayıcı kullanın.
Ⅴ. Tam otomatik elisa'nın renk gelişimi
1. Olası sebepler:
(1) geliştirici hazırlıktan sonra çok uzun süre bırakıldı veya süresi dolmuş bir geliştirici kullandı;
(2) geliştirici eklendiğinde, delikten dışarı çıkar ve sıvının geri akmasına neden olur.
2. Çözüm:
(1) renk geliştiricisi mümkün olduğunca kullanmadan önce hazırlanmalı ve süresi dolmuş renk geliştiricisi kullanılmamalıdır. Açık mavi TMB renk geliştiricisi kullanılmaz;
(2) örnekleri eklerken geliştiricinin dışarı akmasını sağlayın;
(3) A ve B sıvısı metal ekipmanla temastan kaçınmalıdır.
Ⅵ. Tam otomatik elisa'nın sonlandırılması
Olası sebep: örneğin, durdurma çözümü eklendiğinde daha fazla kabarcık üretilir ve bu da yanlış pozitiflerde bir artışa neden olur. Bu nedenle, durdurma çözümü eklerken hava kabarcıklarından kaçının.
Ⅶ. Tam otomatik ELISA plaka okuma
Plakanın alt kısmı plakayı okurken temiz değilse, mikro plakanın temiz olduğundan emin olun. Bu nedenle, tüm operasyon sürecinde, ELISA plakasının hipoklorlu asitle temas etmemesini ve tam otomatik ELISA test standartlarının otomasyonunu mümkün olduğunca gerçekleştirmesini sağlar. Hangi etkili test kalitesini artırır. Ayrıca, nitelikli bir ELISA seçmek önemlidirIş istasyonu tedarikçisi.
Gerçek operasyonda, iyi reaktifleri seçmenin yanı sıra, operasyon adımları kesinlikle takip edilmelidir. Aynı zamanda, iç kalite kontrol ve dış kalite değerlendirmesinde iyi yapmalıyız ve her örneği, denetimin kalitesini sağlamak için titiz bir çalışma stili ile incelemeliyiz. Günümüzde, çin'de oldukça fazla birim, tamamen otomatik ELISA standart testinin gerçekleştirilmesinde ve test kalitesinin iyileştirilmesinde önemli bir rol oynayan tam otomatik mikroplaka okuyucularına sahiptir.
Bize e-posta: